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組織、細(xì)胞到底該如何裂解？

組織、細(xì)胞到底該如何裂解？實(shí)驗(yàn)過程中難免會遇到特殊樣本比如組織和細(xì)胞，那我們我們又該如何來處理呢？常見的處理方法就是用RIPA來裂解。如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀，請放室溫半小時(shí)或者常溫水浴使沉淀溶解。根據(jù)使用量，取每1mlRIPA加入10ulPMSF，使PMSF的終濃度為1mM，混勻備用（PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加）。1、樣品前處理：a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和...

小鼠ELISA試劑盒操作步驟

小鼠ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠甲狀旁腺素(PTH)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠甲狀旁腺素(PTH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計(jì)算樣品濃度。小鼠ELISA試劑盒樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于10...

詳談各種酶活檢測方法

詳談各種酶活檢測方法通常酶制劑活性的檢測是采用實(shí)驗(yàn)室分析手段來進(jìn)行評價(jià)，它可以用來篩選酶制劑、確定復(fù)合酶制劑的zui佳組方及確定產(chǎn)品的zui佳添加量等，酶制劑實(shí)驗(yàn)室評價(jià)技術(shù)是目前飼料廠家應(yīng)用zui為廣泛的一種方法。其操作相對簡單，檢測所用時(shí)間短，便于生產(chǎn)實(shí)踐應(yīng)用。酶活測定結(jié)果雖不能*反映酶的使用效果，但通過檢測至少可以避免使用劣質(zhì)的酶制劑。我國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中已經(jīng)確立了飼用植酸酶（GB/T18634）、纖維素酶（NY/T912）、β-葡聚糖酶（NY/T911）的測定方法。另外，...

elisa試劑盒的選購參考因素

由于elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn)，深受廣大師生朋友的喜愛。而現(xiàn)試劑盒種類頗多，產(chǎn)品的選擇成為了實(shí)驗(yàn)前的重點(diǎn)事項(xiàng)。廠家根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，建議從這四大因素來考慮選擇合適的elisa試劑盒。一、檢測方式如今檢測ELISA試劑盒有許多途徑，我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色，可以通過分光光度計(jì)進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以...

除人為因素外,還有那些因素會影響小鼠Elisa試劑盒使用

ELISA是目前應(yīng)用zui廣泛的免疫標(biāo)記檢測方法。但由于ELISA自身存在的缺陷和某些人為因素都可造成實(shí)驗(yàn)性誤（漏）診的發(fā)生，分析引起實(shí)驗(yàn)誤差因素。除人為因素外，影響小鼠Elisa試劑盒的弊端如下：1）試劑的運(yùn)輸與貯存ELISA試劑盒熱穩(wěn)定性差，遇熱后靈敏度、特異性都將降低。在37℃下放置1d相當(dāng)于4℃～10℃保存1.6個(gè)月，而ELISA試劑盒的貨架壽命只有6個(gè)月，這樣就要求試劑盒的在4℃～10℃下運(yùn)輸貯存，各實(shí)驗(yàn)室老師在試劑盒貯存環(huán)節(jié)上都能達(dá)到要求，但目前尚無法保證試劑盒的...

呋喃它酮快速檢測試劑盒檢測原理

呋喃它酮是一種人工合成的硝基呋喃類抗菌藥物，對大腸桿菌、沙門氏菌、真菌、原蟲等有很好的殺滅效果。呋喃西林進(jìn)入動物體內(nèi)很快分解，其代謝物亦有致癌、致畸等作用。美國、歐盟、日本和中國等均禁止呋喃它酮用于食品動物。呋喃類藥物本身的檢測很難，因?yàn)樵谑橙脒@些藥物后會很快地發(fā)生代謝。這些代謝產(chǎn)物會在組織中存在很長時(shí)間。呋喃它酮代謝物在一般的烹調(diào)中不易分解，在溫和的酸性條件下可以從組織中釋放出來。因此可以用來做檢測使用。呋喃它酮快速檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測蜂蜜、魚、蝦、禽、...

人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒操作步驟

人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒操作步驟1、使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2、根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻...

elisa定量試劑盒實(shí)驗(yàn)室一些錯(cuò)誤的操作習(xí)慣

elisa定量試劑盒實(shí)驗(yàn)室一些錯(cuò)誤的操作習(xí)慣1.實(shí)驗(yàn)的所有操作，都要先學(xué)習(xí)老師的標(biāo)準(zhǔn)，然后進(jìn)行自己操作，常常看到有有人連滴管都不知道如何拿，滴定管(尤其是堿式滴定管)如何進(jìn)行滴加。2.聞氣體要揮氣入鼻，別看一個(gè)小小的操作，曾經(jīng)聽說有人因?yàn)槁劻艘豢贑l2進(jìn)了醫(yī)院。3.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)禁止吃東西，喝飲料。曾經(jīng)有人因?yàn)橐贿吙达@微鏡一邊吃東西，把旁邊的試劑喝了進(jìn)去，盡管急事洗胃也免不了殘疾。也同樣禁止使用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的試劑當(dāng)成“食品及添加劑”，比如：NaCl或者蒸餾水，因?yàn)槟悴恢繬aCl內(nèi)的純...